ネコの多発性嚢胞腎における新しい遺伝子多型を発見

2023-07-26

2023-07-25 東京大学

発表のポイント

多発性嚢胞腎はネコで最も多い遺伝性腎疾患とされていますが、日本での発生率はよくわかっていませんでした。本研究では比較的大規模なネコの疫学調査を実施することで国内での発生率や好発品種をはじめて推定しました。
ネコの多発性嚢胞腎はPKD1遺伝子のエクソン29にナンセンス多型(chrE3:g.42858112C>A)が生じることで発症することが知られており、この一つの多型がネコの多発性嚢胞腎の多くの症例で検出されます。しかし多発性嚢胞腎を発症したネコの一部ではPKD1遺伝子エクソン29のナンセンス多型(chrE3:g.42858112C>A)が認められない症例も報告されており、その他の多型の存在が推測されていました。
本研究では、多発性嚢胞腎のネコでのみ見つかった新規の多型として、PKD1遺伝子エクソン15に4種類の多型(chrE3:g.42848361A>C、chrE3:g.42848725delC、chrE3:g.42849470G>C、chrE3:g.42850283C>T)を同定しました。今回の知見は、ネコの多発性嚢胞腎の新規遺伝子診断の開発および遺伝子検査に基づいた適切な交配による予防法の確立につながることが期待されます。

多発性嚢胞腎を発症したネコの腎臓(MRI検査)

発表内容

東京大学大学院農学生命科学研究科の前田真吾准教授、アニコム先進医療研究所株式会社の松本悠貴研究員、国立遺伝学研究所の中村保一教授らの研究グループは、多発性嚢胞腎のネコでのみ検出されるPKD1遺伝子多型を新たに4種類同定しました。
多発性嚢胞腎は、ネコで最も一般的な遺伝性腎疾患です。腎臓に多数の嚢胞が形成されることが特徴であり、時に肝臓や膵臓にも嚢胞が発生します。腎臓に形成された嚢胞は加齢とともに数と大きさを増し、腎実質の圧迫により腎機能が低下します(図1)。ネコ多発性嚢胞腎の多くの症例でPKD1遺伝子エクソン29にナンセンス多型(注1:chrE3:g.42858112C>A)が検出されることが2004年にLyonsらによって報告され、ネコの多発性嚢胞腎の原因と考えられています(図2)。この変異体はストップコドンとなるため、それ以降の翻訳が停止し、C末端側のタンパク質が約25%喪失します。この変異体がホモ接合体の場合、胎生致死となるため、多発性嚢胞腎のネコは必ずヘテロの多型を有することが知られています。これまでに海外における複数の疫学調査が報告されていますが、日本での大規模な疫学調査は行われていませんでした。また、PKD1遺伝子エクソン29のナンセンス多型(chrE3:g.42858112C>A)以外の遺伝子多型が存在するのかについては、国内・海外ともに報告がなく不明でした。

図1:多発性嚢胞腎を発症したネコの画像所見(左:超音波検査、右:MRI検査)
超音波検査では腎臓の皮質に無エコー性の嚢胞が認められる。MRI検査ではT2強調画像で高信号の嚢胞が多数認められる。

図2:ネコの多発性嚢胞腎でみられるPKD1遺伝子エクソン29ナンセンス多型
多発性嚢胞腎を発症したネコの多くでPKD1遺伝子のエクソン29に“TGC”がストップコドンである“TGA”に
置換するナンセンス変異(chrE3:g.42858112C>A)を認める。

本研究では、2015年から2018年の間に東京大学大学院農学生命科学研究科附属動物医療センターに来院し、血液検査を実施したネコ1,281頭を対象に疫学調査を行いました。各ネコの血液からDNAを抽出し、PKD1遺伝子エクソン29ナンセンス多型(chrE3:g.42858112C>A)の有無を調べたところ、1.8%(23/1,281頭)のネコがPKD1遺伝子エクソン29ナンセンス多型(chrE3:g.42858112C>A)を保有していました。このナンセンス多型は、画像検査で腎臓に多発性の嚢胞を認めた21頭のネコのうち15頭(71.4%)で認められました。ペルシャ、スコティッシュ・フォールド、エキゾチック・ショートヘアでは、他の品種に比べてPKD1遺伝子エクソン29ナンセンス多型(chrE3:g.42858112C>A)を有する確率が有意に高いことがわかりました。
本研究で調べた1,281頭のネコのうち、6頭(0.5%)は画像検査にて腎臓に多発性の嚢胞を確認したものの、PKD1遺伝子エクソン29ナンセンス多型(chrE3:g.42858112C>A)は検出されませんでした。そのためこれら6頭のネコではPKD1遺伝子の他の領域に有害な多型が存在するという仮説を立て、アニコム先進医療研究所株式会社および国立遺伝学研究所と共同で、PKD1遺伝子の全エクソンを対象にターゲットリシーケンス(注2)を実施しました。その結果、PKD1遺伝子エクソン29ナンセンス多型(chrE3:g.42858112C>A)を持たない多発性嚢胞腎のネコでのみ検出される4種類の新規遺伝子多型(chrE3:g.42848361A>C、chrE3:g.42848725delC、chrE3:g.42849470G>C、chrE3:g.42850283C>T)を同定しました(図3)。興味深いことに、新たに同定された4種類のPKD1遺伝子多型はすべてエクソン15に位置していました。この中で、chrE3:g.42848725delCはフレームシフトを起こす多型(注3)であることから翻訳産物に大きなダメージを与えると考えられました。残りの3つの多型はミスセンス多型(注4)でしたが、この中で特にchrE3:g.42850283C>Tが翻訳産物にダメージを与える可能性のある多型であることが解析プログラムにより予想されました。

図3:ターゲットリシーケンスによるネコ多発性嚢胞腎の新規遺伝子多型の解析例
図は新しく同定したPKD1遺伝子エクソン15のミスセンス多型(chrE3:g.42850283C>T)を示す。

本研究成果は、ネコの多発性嚢胞腎における病態生理の理解、新規遺伝子診断の開発、ひいては遺伝子検査に基づいた適切な交配による予防法の確立につながる可能性があります。

発表者

東京大学大学院農学生命科学研究科獣医学専攻
下森文敬(博士課程)
野々垣彩香(研究当時:学部生)
茂木朋貴(研究当時:特任助教)
米澤智洋(准教授)
桃井康行(教授)
前田真吾(准教授)

アニコム先進医療研究所株式会社　研究開発部
松本悠貴(研究員)

国立遺伝学研究所　情報研究系
坂本美佳(特任研究員)
谷澤靖洋(助教)
中村保一(教授)

発表雑誌

雑誌: Journal of Feline Medicine and Surgery
題名: Large-scale epidemiological study on feline autosomal dominant polycystic kidney disease and identification of novel PKD1 gene variants
著者: Fumitaka Shitamori, Ayaka Nonogaki, Tomoki Motegi, Yuki Matsumoto, Mika Sakamoto, Yasuhiro Tanizawa, Yasukazu Nakamura, Tomohiro Yonezawa, Yasuyuki Momoi, Shingo Maeda*(*責任著者)
DOI: 10.1177/1098612X231185393
URL: https://journals.sagepub.com/doi/10.1177/1098612X231185393