エンベロープウイルス粒子を検出するサンドイッチELISAを実現 ―脂質膜結合性リガンドの利用により「タンパク質」検出を「ウイルス粒子」検出に変換―

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2026-04-06 東北大学

東北大学の研究チームは、エンベロープウイルス粒子を直接検出できる新しいサンドイッチELISA法を開発した。脂質膜に結合する両親媒性αヘリックスペプチド(AHペプチド)を検出リガンドとして用いることで、従来のようにタンパク質ではなく「ウイルス粒子そのもの」を選択的に検出可能とした。これにより遊離タンパク質には反応せず、感染力を持つ粒子の機能評価が可能となる。A型インフルエンザウイルスで実証され、抗体やDNAアプタマーの組み合わせにより他のウイルスにも応用可能。感染症研究や診断技術の高度化に貢献する新手法である。

エンベロープウイルス粒子を検出するサンドイッチELISAを実現 ―脂質膜結合性リガンドの利用により「タンパク質」検出を「ウイルス粒子」検出に変換―
図1. 本手法の概略図:(i) 基板に固定化したHAを認識するDNAアプタマーによるIAV捕捉、(ii) ウイルス脂質膜に結合するtrApoC-C12リガンドへの結合(iii) HRP部位によるTMB酸化反応による発色・検出

<関連情報>

インフルエンザAウイルス粒子の比色サンドイッチアッセイのための、ウイルス膜を標的とする両親媒性らせん状ペプチドリガンド Viral Membrane-Targeting Amphipathic Helical Peptide Ligands for Colorimetric Sandwich Assays of Influenza A Virus Particles

Kota Matsumoto,Yusuke Sato,Yusaku Hatanaka,Satoshi Kurihara,Yoshitaka Sato,Arihiro Narita,and Seiichi Nishizawa
ACS Sensors  Published: April 2, 2026
DOI:https://doi.org/10.1021/acssensors.6c00241

Abstract

Viral membrane-binding amphipathic helical (AH) peptides were explored as detection ligands in the sandwich-type colorimetric assay for selective detection of target influenza A virus (IAV) particles, combined with DNA aptamer-mediated capturing on a microplate. A truncated AH peptide from the C-terminal of apolipoprotein A-I (trApoC) was conjugated with a lipophilic tail (C12) to construct the detection ligand capable of binding to highly curved viral membranes via hydrophobic insertion. The resulting trApoC-C12 can efficiently bind to viral membranes of IAV particles captured by the immobilized aptamer. Horseradish peroxidase (HRP)-conjugated trApoC-C12 exhibited a strong and selective colorimetric response toward IAV particles (limit of detection (LOD) = 9.4 × 107 particles/mL) over recombinant hemagglutinin (HA) proteins and other enveloped viruses. Unlike conventional antibody-based ELISAs that detect viral proteins, this assay achieves IAV particle-level selectivity by exploiting viral membrane binding as the recognition mechanism. Our assay was thus shown to be applicable to the assessment of infectious titers of IAV. Furthermore, the detection sensitivity could be remarkably improved by 3.4-fold (LOD = 2.8 × 107 particles/mL) by coupling trApoC-C12’s binding with the hybridization chain reaction (HCR) on the viral membranes. The developed assay is expected to be a powerful and straightforward platform for the practical detection and quantification of enveloped virus particles.

医療・健康
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