超解像蛍光顕微鏡を用いて、標的タンパク質をどの程度確実に標識できるかを決定する方法を開発(Biophysics: Testing how well biomarkers work)

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2024-04-24 ミュンヘン大学(LMU)

ルートヴィヒ・マクシミリアン大学のラルフ・ユングマン教授のチームは、超解像顕微鏡技術の精度を飛躍的に向上させる新技術を開発しました。この技術では、異なる色で発光する参照バイオマーカーを使って、ターゲットタンパク質にどれだけ効率よくマーカーが結合しているかを定量的に評価することができます。この方法は、さまざまなターゲット分子、バイオマーカー、試料に適用可能であり、様々な超解像顕微鏡法と互換性があります。

<関連情報>

単一タンパク質レベルでの絶対標識効率の定量化 Quantification of absolute labeling efficiency at the single-protein level

Joschka Hellmeier,Sebastian Strauss,Shuhan Xu,Luciano A. Masullo,Eduard M. Unterauer,Rafal Kowalewski & Ralf Jungmann
Nature Methods  Published:24 April 2024
DOI:https://doi.org/10.1038/s41592-024-02242-5

figure 1

Abstract

State-of-the-art super-resolution microscopy allows researchers to spatially resolve single proteins in dense clusters. However, accurate quantification of protein organization and stoichiometries requires a general method to evaluate absolute binder labeling efficiency, which is currently unavailable. Here we introduce a universally applicable approach that uses a reference tag fused to a target protein of interest. By attaching high-affinity binders, such as antibodies or nanobodies, to both the reference tag and the target protein, and then employing DNA-barcoded sequential super-resolution imaging, we can correlate the location of the reference tag with the target molecule binder. This approach facilitates the precise quantification of labeling efficiency at the single-protein level.

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生物工学一般
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