記憶のメカニズム解明や神経疾患の診断への活用に期待
2021-02-05 名古屋大学,京都大学,科学技術振興機構
ポイント
- 記憶の分子メカニズムを解明するために、神経伝達物質受容体に対して迅速に目印を付ける方法が求められていた。
- 記憶や学習に必須のグルタミン酸受容体にわずか数分で蛍光の目印を付ける方法を開発し、グルタミン酸受容体の動きを定量的に評価することに成功した。
- この蛍光標識技術では受容体の動きを詳細に可視化できるので、グルタミン酸受容体の異常で起こる脳卒中などの神経疾患や精神疾患の原因解明、および新たな診断技術開発への応用が期待される。
名古屋大学 大学院工学研究科の清中 茂樹 教授、京都大学 大学院工学研究科の浜地 格 教授らは、記憶や学習に必須でありながら、その異常は脳卒中などの疾患の原因ともなってしまう、脳内たんぱく質のグルタミン酸受容体に対して、蛍光色素などの目印を迅速に付ける（蛍光標識する）手法を開発しました。
脳内において、グルタミン酸受容体は記憶や学習に関わる重要なたんぱく質で、その代表例として、ＡＭＰＡ受容体やＮＭＤＡ受容体が知られています。グルタミン酸受容体の神経細胞内での動きを知ることは、記憶のメカニズム解明だけでなく、神経疾患の診断方法などにもつながります。そのためには、神経細胞の受容体に蛍光の標識を付けて、記憶の強化や減弱に伴う受容体の発現量の変化を解析できる技術の開発が不可欠です。これまでに、蛍光たんぱく質（２００８年下村 脩 先生らのノーベル化学賞）を使ってＡＭＰＡ受容体やＮＭＤＡ受容体を蛍光標識する技術が開発されています。しかし、蛍光たんぱく質を用いた方法では、多くの場合において新たに蛍光たんぱく質を標識した受容体を遺伝子工学的に神経細胞内に強制発現させる必要があるだけでなく、蛍光たんぱく質のサイズが大きいために受容体の本来の機能を阻害することも問題となっていました。そのような背景のもと、本研究グループは、２０１７年にＡＭＰＡ受容体に対して蛍光の標識を付けることができる小分子化合物を見いだしました。しかし、蛍光標識には２～４時間の時間を必要としたため、受容体の動きの定量的な観察には問題を抱えていました。もし、迅速に蛍光標識することができれば、任意のタイミングで定量的に観察することが可能となります。
今回、ＡＭＰＡ受容体およびＮＭＤＡ受容体に対して選択的に目印を付けられる新たな有機小分子化合物を開発し、２～３分と従来法に比べて６０分の１以下の時間で蛍光標識を実現しました。この手法を用いることで、神経細胞でのＡＭＰＡ受容体およびＮＭＤＡ受容体の動きの定量解析に成功し、モデル動物細胞に発現させた場合に比べて、受容体たんぱく質の寿命が約６倍と大幅に長くなることを見いだしました。また、この迅速な蛍光標識技術により、神経細胞内ではＡＭＰＡ受容体が効率的に細胞膜と細胞内を行き来（リサイクリング）することも明らかにしました。今後、この蛍光標識技術を用いて受容体の動きを詳細に可視化することで、記憶や学習の脳高次機能の解明だけでなく、神経疾患や精神疾患の原因解明や新たな診断方法の開発につながることが期待されます。
本研究成果は、２０２１年２月５日に国際学術誌「Ｎａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ」のオンライン版で公開されます。
本研究成果は、慶應義塾大学 医学部 柚﨑 通介 教授との共同研究の成果であり、科学技術振興機構（ＪＳＴ） 戦略的創造研究推進事業 総括実施型（ＥＲＡＴＯ）の研究領域「浜地ニューロ分子技術」（研究総括：浜地 格 京都大学 教授）の一環として行われました。
＜論文タイトル＞
- “Ligand-directed two-step labeling to quantify neuronal glutamate receptor trafficking”
（グルタミン酸受容体の動態の定量化を可能とするリガンド指向性２ステップラベル化法） - ＤＯＩ：10.1038/s41467-021-21082-x
＜お問い合わせ先＞
＜研究に関すること＞
清中 茂樹（キヨナカ シゲキ）
名古屋大学 大学院工学研究科 生命分子工学専攻 教授
浜地 格（ハマチ イタル）
京都大学 大学院工学研究科 合成・生物化学専攻 教授
＜ＪＳＴ事業に関すること＞
加藤 豪（カトウ ゴウ）
科学技術振興機構 研究プロジェクト推進部 グリーンイノベーショングループ
＜報道担当＞
名古屋大学 管理部 総務課 広報室
京都大学 企画・情報部 広報課 国際広報室
科学技術振興機構 広報課
