目の丸い形ができる仕組みを解明～「器官の形作り」の理解から再生医療への貢献に期待～

目の丸い形ができる仕組みを解明
―「器官の形作り」の理解から再生医療への貢献に期待―概要
　京都大学ウイルス・再生医科学研究所、永樂元次 教授(発生システム制御分野)および、奥田覚 科学技術 振興機構(JST) さきがけ専任研究者(兼任:京都大学ウイルス・再生医科学研究所 共同研究員、理化学研 究所 客員研究員)らの研究グループは、目の丸い形の元となる「眼杯組織」の形態が作られる仕組みを解明しました。生物の形作りは、人の身体の発生や疾患などの様々な生命現象に関わるため、基礎研究と医療の両方にとって重要です。特に、試験管の中での「「器官の形作り」を理解し操作することは、今後の再生医療に使 用する組織の立体形状を制御するためには重要だと考えられています。本研究グループはまず、複雑な眼杯組 織の形が作られる仕組みを理解するため、実験で得た眼杯組織の情報を基にしてコンピューターシミュレーシ ョンを行いました。そして、眼杯組織の丸い形を作るためには、組織の場所ごとに細胞が異なる力を生み出す 必要があると予測しました。また、マウスの胚性幹細胞(ES 細胞)を培養して作製した眼杯組織を使って、 この予測を確かめました。さらにその結果から、眼杯組織の丸い形が作られる際には、1 つ 1 つの細胞が、眼 杯組織全体の変形度合いを感じながら、その丸い形を微調整していることが分かりました。これらの発見は、 「器官の形作り」に対する機械的な力の新しい役割を示しており、今後の再生医療に必要となる、試験管内で の複雑な組織・器官の作製に役立ちます。
本成果は、2018 年 11 月 22 日に米国の国際学術誌「Science Advances」にオンライン掲載されました。1.背景
　近年、iPS 細胞や ES 細胞を試験管の中で培養し、人工的に作製した細胞・組織を人体へ移植する「再生医 療」の研究が盛んに行われています。しかし、試験管の中では、いつも同じ形の組織が作られるわけではなく、 作られる組織の形が大きくバラついてしまいます。そのため、現在のところ、網膜のような複雑な構造を持つ 器官の立体形状を再現よく作製する技術は実現できていません。この問題を解決するためには、作製する器官 の形作りの仕組みを理解し、試験管の中でのその過程を正確に制御する必要があります。
本研究グループは、数多くある器官の中でも、網膜の組織の元となる「「眼杯組織」に着目しました「(図1)。 この眼杯組織は、複数の細胞種からなるカップ状の丸い形をした組織であり、再生医療で移植が検討されてい る網膜組織を含んでいます。眼杯組織の形作りの過程では、まず、シート状の脳組織の一部が外側へ突き出し ます。次に、突き出たシート状の脳組織の先端が網膜組織へと分化しながら内側へ入り込み、カップ状の二重 構造を作ります。さらに、カップの淵の組織が尖ることで、眼杯組織の丸い形が作られます。
このような目の丸い形は、魚、鳥、人など、様々な動物に共通します。また、その元となる眼杯組織の構造 は高等学校の生物科目の教科書に登場するように、一般的によく知られています。本研究グループは、以前の 研究で、ES 細胞を培養して眼杯組織を作製することに成功し、眼杯組織の丸い形が脳組織から突出した神経 組織のみの力で作られることを明らかにしました。また、内側に入り込む領域で特異的にミオシンと呼ばれる タンパク質の活性が弱まることや、細胞増殖がカップ形成に重要な役割をすることが分かっていました。しか し、これらの細胞レベルの現象がカップ全体の形作りにどのように寄与するかは未だ分かっておらず、目の丸 い形が作られる詳しい仕組みは未解明なままでした。
図1:目の丸い形の元となる眼杯組織の形作り2.研究手法・成果
　眼杯組織の形作りでは、多くの細胞が増殖したり、死んだり、異なる細胞種へと分化したり、変形したりし ながら、組織全体の立体的な形を作ります。本研究グループでは、このような複雑な形作りの仕組みを理解するため、コンピュータを使って組織の立体的な動きを予測する、新しいシミュレーション技術を開発しました。 このシミュレーション技術により、コンピュータ内のバーチャルな世界で器官の形作りを再現し、その仕組み を予測できるようになりました(図2下)。さらに、シミュレーションによって予想された仕組みが正しいか どうかを、ES 細胞から作製した眼杯組織(図2上)を使った実験で確かめ、未知であった眼杯組織の形作り の仕組みを解明しました。


図2:シミュレーションにより再現した眼杯組織の形作り研究の結果、眼杯組織の丸い形は、図3のように作られることが分かりました。はじめに、脳から突出した 神経組織の内側の面には、ミオシンが集まり、内側の面を収縮する力が働いています(⓪)。まず、突出した 組織の先端が網膜組織へ分化し、内側に溜まったミオシンの働きが弱まることで、網膜組織が自発的に内側へ 入り込みます(①)。この網膜組織の自発的な入り込みにより、網膜組織と周辺の網膜色素上皮との境界(カ ップの縁)の細胞は、無理やり曲げられます(②)。この境界の細胞は、無理やり曲げられたことで生じる機 械的な力を感じ取り、それをきっかけにして組織の厚み方向に沿って能動的に収縮することで、網膜組織をさ らに内側へ押し込みます(③)。つまり、境界の細胞は、機械的な力を通して、眼杯組織全体の変形度合いを 感じながら、その丸い形を微調整していることが分かりました。

図3:1つ1つの細胞が機械的な力を通して眼杯組織全体の丸い形を調整する

本研究グループは、人を含む生物の形作りにおける、新しい組織形態の調節機構を発見しました。これまで の研究で、組織内に広がる液性の分子が組織の形の一部を調節することが分かっていましたが、液性の分子だ けでは立体的な組織全体の形の変化を1つ1つの細胞へ正確に伝えることは困難です。一方で、機械的な力は、 このような立体的な形の変化を各細胞へ伝えることが可能です。
また、この組織形態の調節機構の発見により、本研究グループで開発したシミュレーション技術が器官の形作りの予測に役立つことが示され、器官の形作りの理解に向けた新しいアプローチとなることを提案しました。 ました。このシミュレーション技術により、コンピュータ内のバーチャルな世界の中で立体的な組織の形を1 細胞のレベルから再現し、その機構を予測することが可能になりました。また、眼杯組織だけではなく他の組 織にも応用できます。 3.波及効果、今後の予定
本研究グループで発見した組織形態の調節機構は、様々な器官の形作りにも共通する可能性があり、基礎生 物学における多様な器官の形作りの理解につながることが期待されます。また、この機構をうまく利用するこ とができれば、試験管内での器官の形作りをより正確に制御できる可能性もあります。さらに、この組織形態 の調節機構の発見には、コンピュータを使ったシミュレーション技術による予測が役立ちました。したがって、 このシミュレーション技術は、他の組織「・器官の形作りの理解や、奇形や癌などの疾患の理解にも役立つ可能 性があります。そこで今後は、発見した組織形態の調節機構の理解をより深めるとともに、シミュレーション 技術の予測精度を高めることにより、さらに複雑な組織「・器官の作製を実現し、未来の再生医療へ貢献したい と考えています。
4.研究プロジェクトについて
本研究は、科学技術振興機構(JST:さきがけ 研究課題名「1細胞動態の統合モデリングによる三次元組織 形成の予測制御」、研究課題番号 JPMJPR16F3)、および、日本医療研究開発機構(AMED:再生医療実現拠 点ネットワークプログラム 疾患・組織別実用化研究拠点(拠点 A)・研究開発課題名:視機能再生のための 複合組織形成技術開発および臨床応用推進拠点)の一環として行われました。また、本研究は、京都大学お よび理化学研究所にて実施されました。
<論文タイトルと著者>
タイトル: Strain-Triggered Mechanical Feedback in Self-Organizing Optic Cup Morphogenesis (日本語訳:眼杯組織の形態形成におけるひずみ惹起性力学フィードバック作用)
著 者: 奥田覚、高田望、長谷川結子、川田正子、井上康博、安達泰治、笹井芳樹、永樂元次 掲 載 誌: Science「Advances